История ВИЧ: как он появился и почему все еще нет вакцины
В последнее время люди больше всего озабочены проблемой распространения COVID-19. Однако это не единственный вирус, методы борьбы с которым еще не до конца ясны: человечество уже давно знакомо с ВИЧ, но болезнь, вызываемая вирусом иммунодефицита, все еще остается неизлечимой, а вакцины так и не предвидится. Доктор биологических наук Леонид Марголис рассказал ПостНауке о том, как впервые обнаружили ВИЧ, откуда он взялся, как происходит заражение и какие нетривиальные задачи приходится решать ученым, чтобы разрабатывать эффективные лекарства от ВИЧ-инфекции.
Вирус-перебежчик: откуда взялся ВИЧ
5 июня 1981 года специалисты из Центра по контролю и профилактики заболеваний США (CDC) опубликовали в своем небольшом бюллетене заметку о новом странном заболевании, которое вызывает непохожую на другие пневмонию, впервые проявившуюся у пятерых молодых гомосексуалов из Калифорнии. Так началась новая эпидемия, на которую вначале мало кто обратил внимание, но которая вскоре охватила весь земной шар: через несколько лет заболели уже десятки миллионов людей.
Вскоре ученые заподозрили, что речь идет о вирусной болезни. В 1983 году вирус иммунодефицита человека открыли независимо друг от друга сразу две мировые лаборатории — специалисты из французского Института Пастера под руководством Люка Монтанье и группа Роберта Галло из Национального института рака в США. Французским исследователям удалось увидеть вирус в электронном микроскопе (позже, в 2008 году, за свое открытие они получили Нобелевскую премию в области физиологии или медицины), а Роберт Галло и его сотрудники доказали, что именно этот вирус вызывает болезнь — синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). Ранее Роберт Галло создал систему постоянно активированных клеток, позволяющую размножить вирус и исследовать его патогенез. Впервые результаты исследований нового ретровируса опубликовали в мае 1983 года в журнале Science. Французские ученые назвали вирус LAV («вирус, ассоциированный с лимфаденопатией»), а американские — HTLV–III, отнеся его к HTLV-вирусам. В 1986 году ученые пришли к выводу, что в обоих исследованиях речь идет о генетически одинаковых вирусах, и дали им одно название — вирус иммунодефицита человека (ВИЧ).
Сегодня исследователям уже давно известно, откуда взялся ВИЧ. А в самом начале эпидемии много рассуждали о его искусственном происхождении, активно распространяли теории заговора вроде той, что это якобы искусственный вирус, созданный для уничтожения представителей черной расы. В Советском Союзе писали, что вирус создан в ЦРУ, но советской молодежи он не угрожает. На самом же деле ВИЧ передался нам непосредственно от обезьян (промежуточного «хозяина», в отличие, например, от коронавируса, у него нет). Среди обезьян до сих пор распространяется вирус SIV (Simian immunodeficiency virus — вирус иммунодефицита обезьян), однако у большинства из них он не вызывает патологий. Им можно искусственно, в лабораторных условиях, заразить только один вид обезьян (макак-резус), и у них SIV вызывает такие же отклонения в иммунной системе, как и у человека. Но на жизнедеятельности других видов обезьян, например мангобеев, вирус вообще никак не сказывается. Сначала ученые думали, что эти приматы обладают настолько хорошей иммунной системой, что просто не заражаются ВИЧ. В действительности — и это было важным открытием в вирусологии — у мангобеев просто не происходит иммунной реакции на этот вирус.
Как бы парадоксально это ни звучало, именно иммунноактивация является движущей силой всей болезни, вызываемой ВИЧ. В организме человека этот вирус, в отличие от остальных патогенов, размножается только в активированных лимфоцитах (T-клетках). Когда мы заражаемся вирусом, наша иммунная система начинает бороться с ним, как с остальными вирусами, и активирует другие клетки, прежде всего лимфоциты, как раз подготавливая их тем самым к инфицированию. Таким образом, ВИЧ атакует именно те клетки, которые требуются для его подавления. А в организме мангобеев никакой реакции на вирус не происходит, и ему просто негде размножаться.
Когда именно вирус «перепрыгнул» с обезьян на человека, можно примерно посчитать по его мутациям, то есть посмотрев, как он постепенно менялся. Но это не совсем точный метод: предполагают, что это произошло то ли в 1930-е, то ли в 1950-е годы. Причем возможно, что похожий вирус не раз «перескакивал» на людей. Из-за этого сейчас существует два его типа — ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Более заразный и патогенный — это первый тип. Но новые штаммы от обезьяны человеку вряд ли будут передаваться, потому что на самом деле это довольно редкое явление.
Эпидемия началась в Африке: кто-то из людей болел, кто-то даже умирал, но до наступления эпохи глобализации ВИЧ не мог распространяться так быстро, как это происходит с вирусами в настоящее время. Сегодня же во всем мире уже около 38 миллионов ВИЧ-инфицированных. Примерно столько же людей скончались от СПИДа и сопутствующих болезней с начала эпидемии. В некоторых странах по количеству заболевших эта неизлечимая болезнь находится на третьем месте после рака и сосудистых заболеваний. В России на текущий момент более миллиона человек имеют статус ВИЧ-положительных.
Способы передачи вируса
ВИЧ передается половым путем и через кровь. В отличие от многих других вирусов, им невозможно заразиться ни воздушно-капельным путем, ни через кожу, ни через рукопожатие, ни через посуду, поэтому общение с ВИЧ-положительным человеком абсолютно безопасно для окружающих.
Изначально среди заболевших ВИЧ было больше мужчин: эпидемия началась среди гомосексуалов. Вероятность заражения при анальном половом акте в 10–20 раз выше, чем при вагинальном, так как через тонкие, хрупкие стенки прямой кишки вирус легко проникает в организм. Гетеросексуальный анальный контакт так же опасен, как и гомосексуальный. При вагинальном половом акте заразиться сложнее, потому что стенки влагалища покрыты толстым слоем эпителия. Передача вируса через оральный секс тоже возможна, но еще менее вероятна: в слюне находятся ферменты, снижающие способность ВИЧ заражать CD4-лимфоциты. Однако за счет частоты половых контактов среди людей в целом, а также из-за различных заболеваний женской репродуктивной системы вероятность заразиться в любом случае остается достаточно высокой. Причем во время полового контакта вирус чаще переходит именно от мужчины к женщине.
До недавнего времени самые высокие показатели по заражению ВИЧ, особенно в России, наблюдались среди наркопотребителей: грязные шприцы — почти 95-процентная гарантия передачи вируса. Но сейчас в процентном соотношении гомосексуалов и наркопотребителей стало среди ВИЧ-инфицированных меньше: инфекция проникла в гетеросексуальную популяцию и продолжает в ней распространяться. Сегодня во всем мире все чаще ВИЧ заражаются женщины и подростки, но по общему числу заражений мужчины все еще лидируют.
Профилактика ВИЧ
С одной стороны, отказ от инъекционных наркотиков и использование презервативов хорошо защищают от инфицирования. С другой — эпидемия все еще продолжается.
Во-первых, некоторые люди просто не знают, что они ВИЧ-инфицированы: в первые несколько дней после заражения может ощущаться легкое недомогание, а затем длительное время симптомы заболевания отсутствуют, и узнать о заражении можно, только сдав специальный анализ. Такие люди являются переносчиками инфекции.
Во-вторых, люди пренебрегают правилами безопасного секса. Так устроена человеческая психология. Мы знаем, что по статистике много людей гибнет под колесами автомобилей, но мало кого эти знания предостерегают от того, чтобы перебегать дорогу на красный свет. Нам кажется, что с нами этого не произойдет. Когда-то в Санкт-Петербурге проводили исследование: опрашивали людей, которые знали, что могут быть заражены. На вопрос, часто ли они пользуются презервативами, утвердительно ответила лишь половина опрошенных.
Диагностика ВИЧ
Симптомы заражения ВИЧ похожи на простудные: в течение недели может быть общее недомогание, повышение температуры, боль в горле. А потом самочувствие человека нормализуется, и он может несколько лет жить, не зная о своем статусе — если не будет специально проверяться на ВИЧ.
Такова стратегия выживания вируса иммунодефицита: он хочет, чтобы его подольше не замечали. Если в самом начале в крови инфицированного человека много вируса, то потом найти его там невозможно. Долгое время ученые думали, что вирус действительно исчезает, и лишь затем поняли, что он переходит из крови в лимфатическую ткань, которую трудно исследовать, но где вирус постепенно размножается, разрушая ее. А спустя несколько лет, когда уже начинается СПИД, вирус вновь возвращается в кровь.
Катя Золотарёва для ПостНауки
Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) — патологическое состояние, развивающееся в результате ВИЧ-инфицирования. Вирус поражает клетки иммунной системы, ее работа угнетается, организм заболевшего человека перестает защищаться и становится подвержен различным онкологическим и оппортунистическим заболеваниям: вирусным, бактериальным, паразитическим или грибковым инфекциям, характерным именно для людей с иммунодефицитными состояниями (кандидоз, пневмоцистная пневмония, гистоплазмоз, кокцидиомикоз, токсоплазмоз, цитомегаловирусная инфекция и др.).
Анализы крови на ВИЧ дают точный результат. Один из них — иммуноферментный анализ (ИФА) — основан на обнаружении антител к вирусу. Иммунный ответ не может справиться с ВИЧ-инфекцией, но вырабатывается у всех зараженных в течение 6–12 недель. Положительный результат, продемонстрированный ИФА, перепроверяется с помощью другого теста под названием «вестерн-блоттинг» (иммуноблот). Точный диагноз ставится только на основании результатов обеих систем. Другой тест по крови на ВИЧ — полимеразная цепная реакция (ПЦР). Его можно делать значительно ранее, чем ИФА, но на его основании ставится лишь предварительный диагноз.
Существуют также экспресс-тесты на ВИЧ, способные найти антитела к вирусу в крови, слюне или моче. Специалисты рекомендуют применять их спустя три месяца после предполагаемого инфицирования.
Минус белок: как мутация защищает от ВИЧ
Некоторые люди невосприимчивы к ВИЧ. Причиной тому является отсутствие у них одного из белков, которые есть на поверхности клеток.
Все вирусы имеют определенную клеточную цель, которую они поражают. Например, в случае с коронавирусом это клетки легких и дыхательных путей. ВИЧ атакует лимфоциты определенного класса. На поверхности вируса есть белок, имеющий сродство к определенному белку на поверхности CD4-лимфоцитов (T-хелперов). Причем выяснилось, что ВИЧ требуется даже два белка, а не один, как это обычно бывает у вирусов. Когда ВИЧ заражает CD4-лимфоциты, он должен зацепиться сразу за две молекулы-рецептора: белок CD4, который у нас есть во всех лимфоцитах, и корецептор CCR5 или CXCR4. Но у менее 1% представителей так называемой европеоидной расы второй белок, CCR5, на поверхности Т-клеток отсутствует. Люди невосприимчивы к ВИЧ, если эта мутация произошла у них по обеим хромосомам, кодирующим нужный вирусу белок. Точную причину этой мутации установить сложно. Произошла она, скорее всего, в Европе, во всяком случае уже после разделения человечества на расы.
Ученые предполагают, что мутация произошла вследствие какой-то неизвестной инфекции и последующего естественного отбора устойчивых к ней людей.
Исследователи пытались разрабатывать идею об искусственном подавлении CCR5 для борьбы с ВИЧ. Однако в лабораторных условиях после его удаления у мышей рождалось потомство с дефектами сердечно-сосудистой системы. Кроме того, люди, которые не могут заразиться ВИЧ, оказались особенно восприимчивы к вирусу Западного Нила, вызывающему серьезные нейродегенеративные последствия.
Изучение ВИЧ
Во-первых, ВИЧ можно изучать — в пределах этических норм — на заболевших людях.
Во-вторых, ученым удалось видоизменить белок в вирусе иммунодефицита таким образом, чтобы он начал заражать обезьян, — этот штамм назвали SHIV (Simian/human immunodeficiency virus). Так появилась экспериментальная модель изучения вируса на обезьянах, над которыми можно проводить опыты, недопустимые на людях.
В-третьих, ВИЧ исследуют на клеточном уровне: изучают высаженные человеческие клетки или отдельно выращивают их в чашках Петри, наблюдая поэтапно их заражение вирусом иммунодефицита. Кроме того, в лаборатории Национального института здоровья в Вашингтоне разработана система, позволяющая изучать размножение и основные патологические события заражения на кусочках лимфатических тканей.
Рекордсмен по мутациям
У вируса иммунодефицита есть несколько стратегий выживания. Во-первых, длительность течения заболевания: она нужна вирусу для того, чтобы человек успел передать инфекцию другим людям. Во-вторых, вирусу выгоден сам способ попадания патогена в организм, в особенности половой путь передачи.
При незащищенном гетеросексуальном половом контакте с ВИЧ-инфицированным человеком у женщин выше риск заразиться вирусом иммунодефицита, чем у мужчин, примерно в 3 раза. Это связано с тем, что в семенной жидкости обнаруживаются большие концентрации вирусных частиц, а ее количество в два-четыре раза больше, чем объем женского полового секрета. Кроме того, у женщин больше площадь поверхности, через которую внутрь организма может проникнуть ВИЧ, а гигиенические процедуры после полового акта у мужчин более просты и эффективны, чем у женщин. Еще одна выгодная для вируса стратегия половой передачи состоит в том, что в матке иммунитет подавлен. Иначе бы оплодотворенная яйцеклетка, содержащая чужие для материнского организма отцовские белки, была бы отторгнута. Ослабленный местный иммунитет защищает и ВИЧ от иммунной атаки.
Третья стратегия выживания вируса иммунодефицита — его попадание в иммунную систему человека. И наконец, еще одно «изобретение» ВИЧ в борьбе за выживание — мутации, которые для него являются гарантией, что иммунный ответ зараженного не сможет его поразить. Чтобы возник иммунный ответ, требуется время. Например, если человек заболел гриппом, то нужно около недели, чтобы иммунитет активизировался и уничтожил вирус. А вот ВИЧ мутирует настолько быстро, что иммунитет, возникающий у зараженного, через неделю вирус уже просто не узнает.
Как правило, РНК-полимераза (фермент, синтезирующий новые копии РНК вируса из копий, вышедших из клеточной цитоплазмы) работает исключительно точно, и мутации возникают редко. В случае же с ВИЧ ДНК-зависимая РНК-полимераза или обратная транскриптаза, синтезирующая новые вирусные РНК, намеренно делает много ошибок (например, за один раз может создать примерно 250 неправильных нуклеотидов), и в результате получается мутировавший вирус. Если на одну вирусную частицу приходится примерно 300 мутаций, то во всем организме ВИЧ-инфицированного за один день вырабатывается просто астрономическое число вирусов — около 1011.
Порядка 99% новых вирионов ВИЧ в организме человека мутируют так быстро и накапливают столько ошибок, что в итоге перестают быть инфекционными. Заражение происходит тем 1% частиц, у которых мутации произошли удачно и дают им возможность продолжать эффективно вызывать болезнь. Все дело в естественном отборе, благодаря которому процветают вирусы с наиболее эффективной стратегией выживания: так, ВИЧ невыгодно сразу убивать человека — наоборот, нужно, чтобы он успел передать вирус дальше. Именно по этой причине все инфекции в истории человечества ослабевают сами по себе, даже без лекарств. Однако ВИЧ пришел к нам слишком недавно, чтобы успеть ослабнуть, — это может произойти только через несколько сотен лет.
Таблетки от ВИЧ
Современное лечение ВИЧ и СПИДа обычно состоит из высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) и симптоматической терапии оппортунистических инфекций. Чем раньше человек начнет антиретровирусную терапию, тем эффективнее она подействует.
Одна из основных проблем подавления ВИЧ — именно способность вируса иммунодефицита видоизменять свою РНК и мутировать, приспосабливаясь к жизни в разных условиях. Раньше антиретровирусная терапия заключалась в приеме только одного лекарства (зидовудина или азидотимидина — AZT), но ВИЧ быстро приспосабливался к этому препарату. Современная ВААРТ основана на одновременном применении сразу нескольких медикаментов, препятствующих различным стадиям развития ВИЧ и подавляющих мутантные формы вируса.
Чтобы клетки заразились ВИЧ, он должен, во-первых, связаться с ними, а во-вторых, слиться с их поверхностью: его оболочка остается снаружи, а внутрь попадает геном, который транспортируется в ядро (в отличие от других вирусов, остающихся в клеточной цитоплазме). Там с генома вируса, состоящего из РНК, снимается копия ДНК и вживляется в ДНК клеток человека. Потом происходит обратный процесс: с ДНК клеток делается копия вирусной РНК, которая идет в цитоплазму. Там вирус снова «собирается» и выходит из клетки.
Антиретровирусная терапия работает таким образом, что против каждого из этапов жизнедеятельности ВИЧ применяется отдельный препарат: один препятствует слиянию вируса с клеткой, другой не дает ему перейти в ядро и внедриться в ДНК клетки, остальные мешают считыванию с ДНК на РНК и с РНК на белок. Поэтому в ВИЧ-терапии применяются сразу три или четыре препарата для противостояния вирусу на каждой из стадий — например, ингибиторы слияния, ингибиторы обратной транскриптазы (перевода РНК в ДНК), ингибиторы РНК-полимеразы.
На сегодняшний день существуют больше 30 лекарств от ВИЧ, причем набор препаратов для лечения ВИЧ-инфекции во всех странах примерно одинаковый. А открытие каждого нового средства требует больших финансовых вложений и длительных испытаний. Также исследователи заняты разработкой новых средств защиты от ВИЧ во время полового акта и способов пост- и преконтактной защиты, а также продолжают поиски стратегий для создания вакцины от вируса иммунодефицита.
Лекарства от ВИЧ все время совершенствуются: постепенно они должны становиться менее токсичными. В идеале человек не должен принимать их каждый день — лучше, если это будет препарат, действующий длительное время. Еще один вариант развития — объединить несколько медикаментов в один.
Одно из направлений в разработке нового лекарства от вируса — поиск способа блокировать белки на поверхности лимфоцитов, к которым присоединяется вирус. Задача другого направления научных поисков в этой области — заставить иммунные клетки перестать активироваться. Сложность в том, что человеку все-таки необходим иммунитет: если его подавить, люди будут заражаться другими болезнями и умирать от банальной простуды. Нужно, чтобы иммунная система организма не активировалась от вируса иммунодефицита и одновременно оставалась способной реагировать на другие инфекции.
С поддержкой современных препаратов ВИЧ-инфицированный человек может жить нормальной жизнью почти столько же, сколько и здоровые люди, не зараженные вирусом. Еще один колоссальный успех науки и медицины в области лечения ВИЧ — снижение рисков рождения инфицированных детей у ВИЧ-положительных матерей. Ученые выяснили, что передача ВИЧ чаще всего происходит не во время беременности, а уже в процессе родов, когда младенец, проходя по родовым путям, поглощает инфицированные жидкости. Без лекарственной терапии вероятность заразить ребенка достигает 40%. Однако если женщина за несколько недель до родов начнет принимать лекарство (из-за токсичности его нельзя пить всю жизнь), то ребенок, вероятнее всего, родится здоровым. В настоящее время вероятность заражения ребенка ВИЧ от матери порядка 1–2%.
Молчащие клетки и берлинский пациент
Тридцать с лишним существующих сегодня противовирусных препаратов могут подавить вирусную инфекцию, и человек будет жить нормальной жизнью, а концентрация вируса в его организме будет ниже, чем можно определить самыми точными современными методами диагностики. Однако если перестать принимать лекарства, проснутся так называемые молчащие клетки, в ДНК которых уже есть ДНК вируса, и произойдет внутреннее заражение — из ресурсов, которые сохранились в организме. К сожалению, время жизни этих клеток — более 70 лет, и за всю жизнь от них не избавиться.
Кроме того, даже если зараженный человек до конца жизни принимает лекарства, которые подавляют вирус, и ему удается жить нормальной жизнью, иногда по совершенно непонятным причинам в его организме происходит иммуноактивация, которая способствует развитию многих других болезней, причины которых еще не вполне понятны, например сердечно-сосудистым заболеваний. Давно известно, что общая иммуноактивация приводит к инфаркту. Даже курение не только вызывает рак легких из-за осаждения никотина на дыхательных путях, но и способствует диабету и сердечно-сосудистым заболеваниям — как раз из-за иммуноактивации. Этот процесс приводит к тому, что у ВИЧ-инфицированных людей, даже проходящих антиретровирусную терапию, внезапно могут начаться болезни, свойственные пожилым людям: сердечно-сосудистые заболевания, ломкость костей, некоторые психологические нарушения, диабет.
Первым человеком, излечившимся от СПИДа, считается американец Тимоти Рэй Браун. Он получил прозвище «берлинский пациент», так как ВИЧ ему диагностировали в 1995 году, когда он учился в Германии. В 2007 году для лечения лейкемии Брауну сделали трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток. И хотя Браун прекратил принимать противовирусные лекарства, даже спустя три года после операции врачи не обнаружили в его крови вируса иммунодефицита. Это произошло потому, что для трансплантации врачи выбрали донора как раз с той редкой мутацией, характеризующейся отсутствием второго белка Т-лимфоцитов, к которому прикрепляется ВИЧ, чтобы заразить клетку. Однако пересадка кроветворных клеток костного мозга — опасная процедура, осложнения после нее могут быть страшнее самого ВИЧ, что исключает ее массовое проведение.
А что с вакциной?
Несмотря на то что ВИЧ начали изучать еще в 1980-х годах, вакцины от него до сих пор не изобрели, и некоторые ученые считают, что разработать ее в принципе невозможно. Это связано с тем, что вирус, попав в организм, мутирует слишком быстро, чтобы иммунная система могла выработать эффективный ответ.
Другие исследователи упорно продолжают работу в этом направлении. Их идея в том, что с помощью генной инженерии можно удалить из вируса его инфекционное начало и вставить в него другой необходимый ген. То есть ученые пытаются создать такой вирус, который не будет инфицировать, но будет вызывать иммунный ответ, и хотят именно его использовать как вакцину. Но пока работы в этой области не увенчались успехом. Вероятно, у человека может появиться иммунитет против этой искусственной модели неинфекционного вируса. Но если он заразится настоящим ВИЧ, то тот опять же быстро мутирует и «убежит» от иммунного ответа.
Поэтому одно из направлений развития науки в этой области — поиск консервативных последовательностей, то есть тех частей вирусного белка, которые не меняются в процессе мутаций. Обнаружить их очень трудно, потому что у ВИЧ, пока он плавает в крови или размножается в лимфатической ткани, они спрятаны. Вирус раскрывается только в момент сцепления и слияния с клеткой.
Актуальные исследования ВИЧ
На сегодняшний день есть две большие проблемы в борьбе с ВИЧ. Во-первых, нужно понять, как избавиться от молчащих клеток, которые активизируются, если ВИЧ-инфицированный перестает принимать лекарства. Пытались их стимулировать, чтобы они начали производить вирус и можно было бы применить антивирусные препараты. Но на 100% их активировать не получается — все равно остаются «молчащие» клетки. В 2020 году Нобелевскую премию по химии присудили ученым, работающим над редактированием генома. Возможно, в будущем именно таким образом получится справиться с ВИЧ — вырезав из ДНК клеток часть, относящуюся к вирусу иммунодефицита.
Во-вторых, ученым нужно понять, как противостоять иммуноактивации, происходящей в организме ВИЧ-инфицированного человека.
В целом сегодня хорошо развита генетическая ветвь науки о ВИЧ: нам многое известно о вирусе, его геноме и мутациях, процессе заражения клетки, механизме слияния и так далее. Вместе с тем о том, как запускается механизм, приводящий к иммунодефициту, известно гораздо меньше. Мы до сих пор в точности не можем ответить на вопрос, почему кроме Т-лимфоцитов, которые заразил вирус, гибнут другие клетки. В частности, мы не знаем, почему гибнут B-клетки.В недавней статье, опубликованной в ведущем Европейском журнале The EMBO Journal, исследователи как раз задаются вопросом, по какой причине при заражении ВИЧ начинается иммунодефицит, а именно почему, если антитела производятся B-клетками, которые вирус не заражает, происходит угнетение производства антивирусных антител. Оказалось, что в вирусах есть белки, один из которых — Nef (Negative Regulatory Factor), ранее казавшийся ученым незначительным, а позднее, как выяснилось, способствующий заражению; он останавливает многие из процессов жизнедеятельности B-клеток. Кроме того, этот маленький вспомогательный белок (accessory protein) продолжает производиться в организме даже тогда, когда не производится сам ВИЧ.
Потенциально именно Nef может являться еще одной мишенью для терапии. Ее разработка — большая задача, которую нужно решить, чтобы победить ВИЧ.
Комментарии 1
